密封完整性測試（CCIT）-從法規到生產(中)

更新時間：2021-11-24 點擊次數：1339次

化學藥品注射劑仿制藥質量與療效一致性評價技術要求（征求意見稿）中，穩定性研究技術要求中提到：“穩定性考察初期和末期進行無菌檢查，其它時間點可采用容器密封性替代。容器密封性可采用物理完整性方法（例如壓力/真空衰減等）進行檢測，并進行方法學驗證。"

在產品生命周期中不同階段對CCIT的要求。實際生產和操作過程中如何滿足這些要求呢？目前市場上有哪些方法可供選擇？不同的產品如何選擇合適的檢測方法呢？本篇將圍繞這些內容展開進一步的討論。

1、常見的容器密封完整性驗證方法主要有如下幾種

1.1 微生物侵入實驗法驗證密封完整性：

往產品容器內灌入培養基并按常規方式壓塞，軋蓋，滅菌后冷卻備用。將冷卻后的容器倒置并將瓶口*浸沒于高濃度的運動菌液中，如大腸埃希菌，銅綠假單胞菌或粘質沙雷菌，4小時后，將容器外表面消毒并培養，看是否有挑戰性細菌在容器內生長。

1.2 飽和鹽水法測試密封性：

有些產品可以做鹽水滲入試驗：在玻璃瓶灌入注射用水，并按常規方法密封（壓塞、軋蓋），此后，將其倒置于一盛有飽和鹽水的托盤內，是膠塞及鋁蓋全部進入飽和鹽水中。將其放入滅菌設備并按常規的滅菌程序滅菌，分析瓶中內容物是否含氯化鈉檢查密封完整性。

1.3 亞甲基藍溶液法：

取適當數量的玻璃瓶，在玻璃瓶中灌入注射用水，按常規方法壓塞、軋蓋。膠塞及樣品的處理最好模擬實際生產工藝。將樣品倒置，放入裝有一定濃度亞甲基藍溶液的容器中，使其*浸沒。將容器放入真空箱中抽真空，維持一段時間，真空箱恢復至常壓，繼續維持一段時間。取出，用水沖洗瓶外，目檢。亞甲基藍溶液不得滲入瓶內。

開發階段的容器密封完整驗證方法有時也用于生產過程中的檢測。

2、常見的密封完整性檢查方法主要有如下幾種

2.1 利用染色浴測試密封性：

在高溫滅菌箱滅菌之后，染色浴的測試可以在滅菌腔室內進行（如果技術條件允許的話），也可在另一個可以調整壓力的容器中進行。將容器*浸沒在染色浴，并且存在負壓的環境中。如果該容器有裂縫，空氣就會從瓶中溢出，當容器表面有正壓時，染色溶液會從裂縫進入瓶內部。通過目檢剔除變色的容器。

對于小批量產品，染色浴是一個相對經濟的做法，不需要很多技術儀器，而且可以檢出較大的泄漏。然而，該方法具有如下缺點：

●必需對染色浴的溶液（染色物）進行控制，維護，并在使用后，以適當的方式排放，以符合環保的要求。此外，應確定清潔步驟，以便可靠的清除染色物的殘留；

●如果是棕色玻璃，那么此方法的靈敏度較差，結果較難確認；

●如果該測試是在另一個可調壓力的容器中進行，過程比較復雜，包括抽真空、加壓（每次需要30分鐘）以及產品轉移、測試等步驟；

●染料被稀釋或隨著時間褪色；

●存在微生物污染風險，在容器上的裂痕須較大，才能在目檢中檢出，微小而不易檢出的染色溶液滲漏，可導致微生物或化學污染。（詳見圖片1示例）。

圖1，染色浴法檢測后不同程度的泄漏樣品

2.2 蒸汽中的密封完整性測試：

灌裝有油性溶液的容器在高壓滅菌箱中抽真空以及連續的壓力變化后，蒸汽可以滲透入容器中，這樣可以在油相中發現可見的渾濁，或者在出現較大的裂痕時，在容器的底部會出現可見的油水兩相分界。這種情況都可以通過目檢或者電氣檢查法檢測到。

考慮到以上檢測方法的缺點，監管和法規更推薦使用無損的物理檢測方法。

3、常見的幾種無損的物理檢測方法

3.1 高壓放電法(HVLD)：

檢測原理：利用高壓放電原理，在待檢藥品兩端分別連接兩個電極，C1和C2為藥液和電極之間的電容（因為絕緣瓶壁的阻擋，電極不能與溶液接觸，所以產生電容），R為藥液的電阻值。當容器不泄漏時，回路中會產生較低的微電流為I1；當容器泄漏時，由于泄漏引起的藥液與電極之間的電容消失，即容抗消失，回路中會產生的較高的電流I2，通過電流值的比對，可以判斷出容器是否泄漏。